라이브 셀 이미징 시스템을 위한 올바른 현미경을 선택할 때 고려해야 할 사항

생세포 이미징 실험을 성공적으로 수행하려면 올바른 접근 방식을 사용하는 것이 중요합니다. 생세포 이미징에 적합한 현미경을 선택할 때 다음 측면을 고려해야 합니다. 표본 생존력, 이미지 획득 속도(시간적 분해능) 및 3차원 모두에서 필요한 분해능.

During live cell imaging, certain environmental conditions must be maintained to avoid detrimental physiological changes. In order to capture physiologically relevant cellular dynamics, live cell experiments require specific environmental conditions, including temperature, pH (via CO2), and humidity control. Furthermore, some experiments may even require hypoxic conditions. Modern incubation systems not only tightly control environmental conditions, they can also provide detailed data reports and alert users to temperature, gas, or humidity variations during the course of an imaging experiment. To minimize or avoid the effects of photodamage, getting the right balance between sensitive detection, accurate label separation (if using >1 라벨)과 여기를 위한 가장 낮은 광량이 중요합니다.

생세포 실험의 경우, 특히 소포 관찰과 같은 빠른 동적 프로세스를 연구할 때 고속 수집이 종종 중요합니다. 광학 필터를 사용하면 여러 구성 요소의 상호 작용을 연구하는 데 사용되는 각 색상에 대한 필터 세트를 변경할 때 순차적 이미징이 필요하기 때문에 속도 제한이 발생합니다. 순차적으로 이미지를 수집하는 데는 동시 이미지 수집보다 시간이 더 많이 걸리고, 각 색상이 한 이미지에서 다음 이미지로 이동하는 시간 간격이 더 길기 때문에 수집 중에 빠른 표본 움직임을 놓칠 수 있습니다. 두 개 이상의 색상을 직접 비교하는 것이 본질적인 경우 신호가 형광체의 개별 수집 사이에서도 이동했을 수 있으므로 데이터 해석이 복잡해집니다.

시간에 따른 3차원 이미지를 획득하기 위해 여러 가지 기술을 사용할 수 있습니다. 시스템 선택은 실험에 따라 달라지며, 원하는 3D 해상도를 획득할 때 이미징 중에 더 높은 속도 또는 더 낮은 샘플 조명이 우선순위인지 여부에 따라 달라집니다. 가장 적합한 시스템을 선택하려면 전통적으로 카메라 기반 또는 공초점 생세포 이미징 시스템 중에서 선택해야 했지만, 최신 솔루션은 두 가지 모달리티를 통합된 방식으로 제공할 수 있습니다.